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1. 免疫表型分析 表面標(biāo)志物檢測:識別細(xì)胞表面蛋白,如CD分子。 細(xì)胞內(nèi)標(biāo)志物檢測:檢測細(xì)胞因子、轉(zhuǎn)錄因子等。 2. 細(xì)胞周期分析 DNA含量檢測:通過碘化丙啶(PI)或DAPI染色,分析細(xì)胞周期各階段。 增殖標(biāo)志物檢測:如Ki-67、BrdU等。 3. 細(xì)胞凋亡檢測 Annexin V/PI雙染:區(qū)分早期和晚期凋亡細(xì)胞。 Caspase活性檢測:評估凋亡相關(guān)酶活性。 線粒體膜電位檢測
多重免疫組化染色原理 :利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,使一抗與組織或細(xì)胞中的靶抗原結(jié)合;加入HRP標(biāo)記的二抗,它能與一抗特異性結(jié)合,形成“抗原-一抗-HRP標(biāo)記二抗”的復(fù)合物,加入酪胺熒光染料,在HRP和過氧化氫的存在下,酪胺被活化并與抗原附近的蛋白殘基共價結(jié)合,大量的熒光素沉積在抗原-抗體結(jié)合部分,使信號得到放大,通過多次重復(fù)上述步驟,每次使用不同的一抗和對應(yīng)的酪胺熒光染料,即可實(shí)現(xiàn)對多個靶標(biāo)
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